本產(chǎn)品是質(zhì)譜分析前處理時(shí)zui常用的蛋白分解酶即賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶，該酶可以特異性切除賴氨酸基團(tuán)C末端的多肽，可用于蛋白測(cè)序分析和Lys-X化合物的酶合成。若同時(shí)使用賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶和胰酶，可更好地切斷賴氨酸 基團(tuán)的多肽，增加多肽的數(shù)量。產(chǎn)品已按照使用習(xí)慣做成小包裝，是方便使用的冷凍干燥品。下面讓我們一起來看看Wako質(zhì)譜級(jí)賴氨酸肽鏈內(nèi)切酶(125-05061)的產(chǎn)品介紹吧！

一、產(chǎn)品屬性

來源：細(xì)菌

外觀：凍干粉（包含2 mmol/L Tris-HCl緩沖液，pH 8）

活性：0.03～0.07 AU/vial

分子量：27,000(瓊脂糖過濾)，30,000（SDS-PAGE）

溶解性：溶于水或緩沖液

穩(wěn)定性：溶解于pH值5.0-12.0的Tris緩沖液中，可在4℃穩(wěn)定保存2年；在pH值6.0-11.0 30℃時(shí)能穩(wěn)定保存，但溫度超過50℃時(shí)不穩(wěn)定。

最適pH值：9.0~9.5

等電點(diǎn)：6.9~7.0

底物特異性：

可水解底物——Tos-Lys-OMe，Bz-Lys-NH2，Bz-Lys-pNA，Lys-pNA

不可水解底物——Bz-Arg-NH2，Bz-Arg-pNA，Arg-pNA

抑制劑：DFP，PMSF，TLCK

二、特點(diǎn)

（1）高特異性、高蛋白質(zhì)消化率、適用于蛋白質(zhì)譜分析

（2）提高裂解效率、增加肽段數(shù)量

（3）根據(jù)使用量特意制備小包裝，方便使用

三、應(yīng)用

分別采用胰蛋白酶(Tp)、賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶 (Lys-C) 和Tp與Lys-C聯(lián)用進(jìn)行膠內(nèi)酶切的效果比較。牛血清蛋白BSA 的條帶(100 ng) 通過SDS-PAGE 獲得，然后分別用Tp、Lys-C和Lys-C+Tp進(jìn)行酶切，再用MALDI-TOFMS法進(jìn)行分析。這些蛋白酶的實(shí)驗(yàn)效果見下表。

胰蛋白酶 (Tp)(圖a) 和賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶 (Lys-C)+Tp (圖b) 酶切后的質(zhì)譜結(jié)果對(duì)照?qǐng)D。

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