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簡(jiǎn)石生物瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒TD407操作步驟

更新時(shí)間:2024-11-08點(diǎn)擊次數(shù):988

簡(jiǎn)石瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒TD407代理——天津益元利康生物科技有限公司。

一、產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn):

1. 從瓊脂糖凝膠中快速(15分鐘)高產(chǎn)量地回收超純的DNA;

2. 特制的微量柱設(shè)計(jì)使得DNA可以在高濃度下洗脫到最小體積(≥10 µl);

3. 洗脫的DNA非常適合用于DNA連接、測(cè)序、標(biāo)記、PCR等應(yīng)用。

簡(jiǎn)石生物瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒TD407操作步驟 

二、操作使用:

(以下離心操作步驟的離心力均在10,000 - 16,000 x g之間進(jìn)行)

簡(jiǎn)石DNA回收試劑盒操作步驟一:

使用刀片或手術(shù)刀把DNA片段從瓊脂糖凝膠上切除下來(lái)并且移置到 1.5 ml 小型離心管內(nèi)。注意從凝膠上切下的瓊脂糖盡可能的要少。

簡(jiǎn)石DNA回收試劑盒操作步驟二:

3倍體積的ADB溶膠液 添加到每1體積從凝膠上切下的瓊脂糖切塊中。例如對(duì)于100 µl (mg) 的瓊脂糖凝膠切塊,添加300 µlADB緩沖液。

簡(jiǎn)石DNA回收試劑盒操作步驟三:

37-55下溫水浴10分鐘直到凝膠切塊quan溶解。注意:確定凝膠切塊quan溶解是很重要的步驟,在溫水浴過(guò)程中可輔以溫和的攪拌有助于凝膠的溶解。如果DNA大小超過(guò)8kb,加熱之后需要額外添加等量膠塊體積的水。 例如:100 µl (mg) 的瓊脂糖凝膠切塊,添加300 µlADB緩沖液,加熱之后添加100µl的水。

簡(jiǎn)石DNA回收試劑盒操作步驟四:

溶解的瓊脂糖切塊溶液放到1號(hào)C中并把柱套在收集管里。

簡(jiǎn)石DNA回收試劑盒操作步驟五:

離心1分鐘后,倒掉過(guò)濾液。注意:柱所能容納的樣品體積為800 µl,所以,如果樣品體積超過(guò)800 µl時(shí),柱就要被多次填充和離心。

簡(jiǎn)石DNA回收試劑盒操作步驟六:

添加200µlDNA洗滌液到柱中離心1分鐘,去除濾出液。

簡(jiǎn)石DNA回收試劑盒操作步驟七:

重復(fù)第6步洗滌步驟。

簡(jiǎn)石DNA回收試劑盒操作步驟八:

可選步驟:將收集管中的廢液倒掉,并將1號(hào)C套回收集管中額外離心2分鐘,盡量除去洗滌液,以免洗滌液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。

簡(jiǎn)石DNA回收試劑盒操作步驟九:

直接添加10 µl DNA洗脫液到柱基質(zhì)中,將柱套在1.5 ml離心管中離心1分鐘來(lái)洗脫DNA。注意:從柱中洗脫出的DNA產(chǎn)量與pH和溫度有關(guān)。如果使用水來(lái)洗脫,確保pH >6.0。在向柱中加入水后靜置1分鐘可增加較大 (> 6 kb) DNA 的產(chǎn)量。在60-70的水中洗脫DNA可增加較大DNA (> 10 kb)的產(chǎn)量。

注意:如果試驗(yàn)需要的話,TE緩沖液 (10mMTris-HCl 1mM EDTA,pH8.0) 或改進(jìn)的TE(10mM Tris-HCl,0.1mMEDTApH8.5) 也可用來(lái)洗脫。

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