以下是百奧益康通用型試劑盒的標準操作流程及關(guān)鍵注意事項(以細胞培養(yǎng)類試劑為例,適用于多數(shù)產(chǎn)品線)
一、百奧益康試劑盒操作前準備
1. 試劑復溫/解凍
- 細胞培養(yǎng)基、血清等置于 2-8℃緩慢解凍(24小時) 或 37℃水浴快速解凍(≤15分鐘),解凍后立即使用。
- 凍干粉試劑(如細胞因子)用 指定緩沖液復溶,輕柔渦旋,避免泡沫。
2. 設(shè)備預(yù)冷/消毒
- 超凈臺紫外滅菌30分鐘,移液器、離心管等表面酒精擦拭。
- 磁珠分選類試劑需提前將 分離架置于4℃預(yù)冷。
二、百奧益康試劑盒核心操作流程
> 以"細胞刺激/培養(yǎng)試劑盒"為例
1. 樣本處理
- 分離PBMC或靶細胞,用 預(yù)冷PBS洗滌2次(300g, 5分鐘),重懸于百奧益康專用基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
2. 試劑配制
- 按說明書比例配制工作液(例:刺激因子母液+培養(yǎng)基稀釋),現(xiàn)配現(xiàn)用。
- 關(guān)鍵點: 含蛋白組分避免反復凍融;促生長因子需避光。
3. 細胞刺激/培養(yǎng)
- 將細胞懸液加入預(yù)鋪工作液的培養(yǎng)板(密度:5×10?/mL),輕搖混勻。
- 培養(yǎng)條件:37℃, 5% CO?, 95%濕度,定期觀察形態(tài)。
4. 結(jié)果檢測
- 收集細胞:72小時后離心(300g, 10分鐘),取上清測因子分泌(ELISA)或細胞裂解液測通路蛋白(WB)。
三、百奧益康試劑盒磁珠分選類試劑盒特殊步驟(如免疫細胞分選)
1. 抗體標記
- 每10?細胞加 10μL抗體混合液,4℃避光孵育 10分鐘。
2. 磁珠結(jié)合
- 加 5μL磁珠/10?細胞,混勻后4℃孵育 15分鐘。
3. 磁性分離
- 置分離柱于磁場中,上樣后收集流穿液(目標細胞),用緩沖液沖洗3次。
四、百奧益康試劑盒關(guān)鍵注意事項
| 步驟 | 致命錯誤規(guī)避 |
| 試劑配制 | 勿用含Ca²?/Mg²?緩沖液稀釋酶制劑 |
| 細胞接種 | 禁止吹打產(chǎn)生氣泡(導致缺氧死亡) |
| 磁珠分選 | 分選柱勿流干(立即補加緩沖液) |
| 凍存保存 | 分裝后液氮速凍,避免反復凍融 |
五、百奧益康試劑盒故障排查速查表
- 細胞活性低 → 檢測試劑pH(標準7.2-7.4)及內(nèi)毒素(<0.1EU/mL)
- 分選純度不足 → 確認抗體用量及孵育溫度(嚴格4℃)
- 試劑沉淀 → 37℃溫浴5分鐘并渦旋(某些生長因子需過濾除菌)

歡迎咨詢天津益元利康生物科技有限公司咨詢選購。
