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細胞的凍存

2023-02-22 細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，利用凍存技術(shù)將細胞冷凍保存在-196℃液氮中，可以使細胞暫時停止生長并保留細胞特性，以便在需要時再復(fù)蘇細胞用于實驗。同時保存適量的細胞，可以防止細胞在培養(yǎng)過程中因受到污染或其他意外事件導(dǎo)致細胞丟種，起到細胞保種的作用。細胞凍存和復(fù)蘇采取“慢凍快融”的原則，慢速冷凍可使細胞內(nèi)的水份滲出細胞外，減少細胞內(nèi)形成冰晶的機會；快融以保證細胞外結(jié)晶快速融化，避免慢速融化水份滲入細胞內(nèi)，再次形成胞內(nèi)冰晶造成對細胞的損傷。細胞凍存時需向培養(yǎng)基中加入冷凍保護劑...

mRNA疫苗工作原理

2023-02-20 新冠mRNA疫苗的工作原理是將病毒的部分mRNA片段（S蛋白序列或S蛋白上受體結(jié)合區(qū)RBD序列）以特殊的脂質(zhì)膜包裹，注入人體細胞內(nèi)產(chǎn)生抗原，再由此激發(fā)特異性免疫反應(yīng)，達到形成免疫記憶的效果。相較于其他疫苗，其優(yōu)勢主要體現(xiàn)在：1.mRNA不進入細胞核，不會整合到人體基因組，消除了插入突變，極大程度上避免了引發(fā)患腫瘤癌癥等疾病的風險；2.具有體液免疫及T細胞免疫雙重機制，免疫原性強；3.研發(fā)周期短，尤其是在應(yīng)對病毒變異時，只需對S蛋白序列的堿基進行突變，就能夠快速開發(fā)新型候選疫苗...

PCR/qPCR耗材選擇——密封產(chǎn)品篇

2023-02-17 最常見的是聯(lián)排管蓋和粘性封板膜。聯(lián)管蓋主要用于密封PCR/qPCR聯(lián)管和板，粘性封板膜主要用于密封PCR/qPCR板。qPCR的管蓋與封板膜應(yīng)該相同厚度和透明度的光學特性。1.管蓋聯(lián)蓋是最常見的密封形式。除了適配性外，還需要考慮管蓋的透光度和形狀。雖然管蓋的透明度對DNA擴增沒有影響，但超透明或光學蓋對于在qPCR實驗中收集可靠數(shù)據(jù)非常重要。管蓋的頂部分為平頂（flat）或圓頂(domed)。如何選擇取決于所使用的PCR儀熱蓋設(shè)計。如果蓋子具有稍微凹入的內(nèi)表面以防止管子變形，...

給藥泵的使用優(yōu)勢

2023-02-16 給藥泵的原理：當泵體被植入動物體內(nèi)時，由于滲透壓差迫使體液透過泵表面的半透膜流向高滲鹽夾層，擠壓貯藥囊，使藥物按照預(yù)定速度經(jīng)導(dǎo)流管釋放到大鼠(包括幼體)、小鼠和其他實驗動物動物體內(nèi)。該泵由外到內(nèi)分為三層，最外層是半透膜材料，最內(nèi)層為不透水彈性材料制成的貯藥囊，中間為高滲的鹽夾層組成。給藥泵的優(yōu)勢：該泵對實驗動物連續(xù)、準確、受控的給藥?？梢詫崿F(xiàn)無人值守、準確給藥的效果，從而減輕實驗室工作人員的夜班和周末給藥的麻煩，節(jié)約了時間，同時無需外部連接和頻繁處理動物，極大的提高了治療的效...

PCR/qPCR耗材選擇——板類特征篇

2023-02-15 ①規(guī)格：PCR/qPCR板一般有24孔、48孔、96孔、384孔。②裙邊：裙邊是孔板周圍的板。它的作用是可以在移液過程中提供較好的穩(wěn)定性，也方便自動化機器人的處理。PCR/qPCR平板可分為無裙邊，半裙邊和全裙邊。無裙邊板缺少周圍的板，它可與絕大多數(shù)PCR儀和qPCR儀的模塊適配，但不適用于自動化應(yīng)用。半裙邊板是在孔板的邊緣有短裙邊，可以在移液過程中提供較好的穩(wěn)定性，也方便自動化機器人的處理。全裙邊的PCR/qPCR板是有著超過板高度的邊緣板。它適用于具有突出模塊的PCR儀，...

PCR/qPCR耗材選擇——一般特征篇

2023-02-13 （1）規(guī)格常見的PCR/qPCR耗材規(guī)格如下管：0.5mL,0.2mL,0.1mL96孔板：0.2mL,0.1mL384孔板：0.02mLPCR/qPCR管/板的規(guī)格決定了反應(yīng)體積。如果加入過多的樣品，一方面會導(dǎo)致熱傳導(dǎo)的效率下降，另一方面會導(dǎo)致樣品溢出或者污染；如果加入的樣品過少，又會因為頻繁的熱循環(huán)導(dǎo)致水分蒸發(fā)，進而導(dǎo)致體系不足、樣品損耗，實驗出現(xiàn)誤差或者無結(jié)果。并且選用的耗材需根據(jù)PCR儀的加熱模塊來決定，以求最DA程度的熱傳導(dǎo)的匹配。（2）高度PCR/qPCR管/板有...

PCR/qPCR耗材選擇——材料及顏色篇

2023-02-09 目前市場上大多數(shù)PCR/qPCR管材選用的是聚丙烯材料。聚丙烯是一種惰性的有機材料，對反應(yīng)物質(zhì)的吸收值最小，并且聚丙烯可以承受PCR過程中的溫度變化，在經(jīng)過溫度變化后不易變形，因此可以確保獲得最佳的PCR結(jié)果。在生產(chǎn)過程中，為了保證生物兼容性、純度以及批次間的一致性，應(yīng)當使用全新的醫(yī)學級的分子生物學級別的高品質(zhì)的聚丙烯作為原料進行生產(chǎn)。有些PCR/qPCR板為了配合高通量機器人的操作，需要具有更高強度的邊框來配合機器人的抓取，通常情況下邊框的材料使用的是更高強度的聚碳酸酯。在...

提取FFPE組織中的核酸時的難點

2023-02-07 使用福爾馬林固定過組織，其組織中的蛋白質(zhì)與核酸（DNA與RNA）會失去生物活性。福爾馬林和石蠟作為固定劑和包埋劑，將細胞保護在其中，十分影響核酸的提取，并且長時間的保存可能會使樣品中的核酸發(fā)生降解。傳統(tǒng)的方法會使用二甲苯來溶解石蠟，這種有機溶劑高度易燃，在實驗過程中需要先多次使用二甲苯來溶解石蠟，之后需要多次使用乙醇來沖洗殘留的二甲苯。在使用二甲苯溶解石蠟的過程中，大量的二甲苯可能會對核酸造成損傷，進一步加劇核酸的降解；在溶解與沖洗過程中，即使再仔細也難免將寶貴的組織材料沖掉...